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培養(yǎng)箱:為珍貴的細(xì)胞樣品提供穩(wěn)定的家

二氧化碳培養(yǎng)箱中,用層流組織培養(yǎng)罩一起是任何細(xì)胞培養(yǎng)的支柱實(shí)驗(yàn)室以**于它通常是在北卡羅萊納州大學(xué)提供給進(jìn)入的調(diào)查包的一部分萊恩伯格綜合癌癥中心。

因?yàn)樵跊Q定哪個(gè)孵化器可能適合您的實(shí)驗(yàn)室時(shí)需要考慮很多事情 - 從尺寸,成本和防止和處理污染的能力,到用戶界面,如何調(diào)節(jié)溫度,濕度和氣體 - 其他重要的考慮因素**初可能會(huì)被忽視。在這里,我們研究一些顯而易見(jiàn)的,而對(duì)于新的合作有些不是很太明顯,決策點(diǎn)2孵化器。

大小事項(xiàng)

定義“標(biāo)準(zhǔn)尺寸”的二氧化碳培養(yǎng)箱  可能是一項(xiàng)具有挑戰(zhàn)性的任務(wù)。

這就是說(shuō),典型的CO2培養(yǎng)箱中在大約五**七立方英尺,或140-**200升,范圍,允許它被放置在工作臺(tái)或地板上。

“一般來(lái)說(shuō),今天所有的孵化器都是獨(dú)立的,但可以堆疊 - 大多數(shù)人會(huì)得到一堆兩個(gè),” Lineberger組織培養(yǎng)機(jī)構(gòu)的長(zhǎng)期主管Steve Oglesbee說(shuō)。

他指出,**好提前知道放置孵化器的位置,這樣可以在門(mén)打開(kāi)方向正確的情況下進(jìn)行訂購(gòu)。“這取決于空氣來(lái)自哪里,因?yàn)楫?dāng)你打開(kāi)它時(shí),你不希望房間加熱或空調(diào)空氣吹進(jìn)一個(gè)房間 - 所以右邊或左邊的鉸鏈會(huì)對(duì)阻擋它產(chǎn)生很大的影響。 “雖然門(mén)可能是可逆的,但可能需要服務(wù)電話才能這樣做。

通常可以訂購(gòu)腳輪或滾輪平臺(tái),用于干式夾套,落地式安裝。這不僅使重新定位孵化器更容易,“它真的很棒,因?yàn)樗梢宰屇愀斓氐竭_(dá)儀器的背面,” 奧克蘭兒童醫(yī)院研究所的科學(xué)家David Killilea說(shuō)。Killilea創(chuàng)建并管理了一個(gè)學(xué)術(shù)核心設(shè)施。

夾克和粉絲

曾幾何時(shí),幾乎所有細(xì)胞培養(yǎng)箱的室都用水套封閉。水的熱質(zhì)量特性產(chǎn)生的內(nèi)部溫度保持相當(dāng)一致和恒定(只要門(mén)保持關(guān)閉),即使在電源故障的情況下也是如此。作為額外的好處,水有助于抑制任何振動(dòng)。但是這種孵化器非常重,需要在移動(dòng)之前將它們排干。這種類型的培養(yǎng)箱可能需要一段時(shí)間才能達(dá)到或恢復(fù)到工作溫度。它們?nèi)菀仔孤K鼈冃枰S護(hù),以免造成污染。

大多數(shù)仍在運(yùn)作的孵化器都是水夾套的。但是,新建,擴(kuò)建和升級(jí)實(shí)驗(yàn)室購(gòu)買(mǎi)的大多數(shù)孵化器都采用了干燥技術(shù)(空氣夾套,直接加熱或混合系統(tǒng))。

過(guò)去幾十年的改進(jìn)使這些孵化器能夠與水套模型的性能相等(除了保持溫度不通電),此外還提供高熱滅菌周期。

供應(yīng)商使用不同的技術(shù)來(lái)確保腔室內(nèi)的空氣在成分和溫度上是均勻的。市場(chǎng)上的大多數(shù)孵化器都有流動(dòng)的粉絲,“可以防止孵化器內(nèi)的分層......并確保所有條件的快速恢復(fù),”賽默飛世爾科技**全球細(xì)胞培養(yǎng)**Mary Kay Bates指出。“我們還在我們的氣流上放置了一個(gè)HEPA過(guò)濾器,以捕獲在空氣中循環(huán)的污染物。” 

對(duì)于Thermo Scientific Heracell™VIOS CO2培養(yǎng)箱,當(dāng)門(mén)打開(kāi)時(shí)風(fēng)扇關(guān)閉,以幫助減少空氣交換。其他供應(yīng)商提供帶有泵或風(fēng)扇的孵化器,它們像“II級(jí)引擎蓋”一樣,具有垂直方向的空氣。因此,當(dāng)你打開(kāi)孵化器的門(mén)時(shí),你就會(huì)有這種垂直的層流,這有助于防止孵化器內(nèi)的東西進(jìn)出,孵化器外面的東西進(jìn)入,“Oglesbee評(píng)論道。

全球許多制造商 - 包括Eppendorf和NuAire--都提供無(wú)風(fēng)扇設(shè)計(jì),消除潛在的污染和振動(dòng)源。“這不僅僅是引力 - 不是完全被動(dòng)的,”BMT科學(xué)部業(yè)務(wù)部門(mén)經(jīng)理Rick Ellison指出。在BMT的情況下,三個(gè)程控加熱電路用于差分控制熱量,從而產(chǎn)生自然對(duì)流。 

保持簡(jiǎn)單,保持清潔

隨溫度,CO 2和濕度很好地控制在現(xiàn)代培養(yǎng)箱,也許是**迫切的一般問(wèn)題是污染的預(yù)防和消除:從其他培養(yǎng)物或從外部導(dǎo)入的東西的培養(yǎng)箱,交叉污染內(nèi)細(xì)菌或真菌的生長(zhǎng)。

許多孵化器設(shè)計(jì)有光滑,無(wú)縫的內(nèi)部表面,以**大限度地減少生長(zhǎng),使設(shè)備易于清潔。“整個(gè)室可以拆卸,擦拭干凈并在不到三分鐘的重新組合,”麗貝卡利諾,微量離心北美的CO產(chǎn)品經(jīng)理表示,2孵化器公司的,  Galaxy系列。

華盛頓大學(xué)轉(zhuǎn)基因資源項(xiàng)目的項(xiàng)目經(jīng)理羅伯特·亨特(Robert Hunter)選擇了銅內(nèi)部代替其他昂貴的附加物,該項(xiàng)目的核心經(jīng)歷了幾次真菌爆發(fā)。但是,Killilea不喜歡純銅氧化時(shí)形成的“丑陋的綠色/棕色銅綠”,也不喜歡**終脫落的灰塵,因此他選擇了“有足夠的銅來(lái)抗菌”的不銹鋼合金。

甚**可以選擇通過(guò)管道系統(tǒng)后面隱藏的紫外線清潔空氣。 

日常維護(hù),如每周擦拭,更換水和水盤(pán)以及更換HEPA過(guò)濾器(如果適用),可以有很長(zhǎng)的路要走。

Oglesbee在您購(gòu)買(mǎi)之前要小心,以確保這些過(guò)濾器可以訪問(wèn),并且可以由實(shí)驗(yàn)室人員輕松更改。

當(dāng)污染確實(shí)發(fā)生時(shí) - 有一句格言“它不是,但是什么時(shí)候”-vendors有各種各樣的處理方法。在干式夾套培養(yǎng)箱中**常見(jiàn)的是濕熱循環(huán)或干熱循環(huán); 這些通常是一夜之間,但有些更快。在過(guò)去,一些孵化器需要準(zhǔn)備,例如移除無(wú)法忍受熱量的傳感器 - 確保找出您想要購(gòu)買(mǎi)的儀器的程序。也可以使用其他不太常見(jiàn)的選擇,例如H 2 O 2或其他化學(xué)滅菌。

深呼吸,保持涼爽

隨著積累的數(shù)據(jù)支持細(xì)胞在更多生理缺氧條件下表現(xiàn)更好的觀點(diǎn) - 尤其是干細(xì)胞,3D培養(yǎng)物和未適應(yīng)培養(yǎng)的原代細(xì)胞等細(xì)胞 - 許多研究人員正在尋找能夠降低氧含量的培養(yǎng)箱。這通常通過(guò)允許氮?dú)獾窒鯕鈦?lái)實(shí)現(xiàn),并且它需要氧氣傳感器以及氮?dú)庹{(diào)節(jié)。“這不是你可以添加的東西。你必須以這種方式訂購(gòu)孵化器,“貝茨說(shuō)。“但你可以點(diǎn)一個(gè)缺氧培養(yǎng)箱,關(guān)閉選項(xiàng)直到你需要它,投資未來(lái)。”許多缺氧培養(yǎng)箱提供分開(kāi)的內(nèi)部玻璃門(mén),允許研究人員一次進(jìn)入一個(gè)架子,減少整體氣體交換。

供應(yīng)商也制作高氧培養(yǎng)箱。“他們不那么受歡迎了。這是一個(gè)小眾應(yīng)用,“貝茨指出。

如果研究人員將設(shè)備 - 振動(dòng)器或顯微鏡 - 或許 - 放入孵化器中,他們可能需要電源以及可能需要其他電纜到外部。Oglesbee建議確保設(shè)計(jì)用于此目的的端口并相應(yīng)地計(jì)劃孵化器的放置。如果該設(shè)備產(chǎn)生足夠的熱量 - 特別是如果房間本身非常溫暖 - 可能需要具有制冷能力的設(shè)備。

CO2培養(yǎng)箱旨在保護(hù)珍貴的細(xì)胞培養(yǎng)物安全和快樂(lè)。為了讓用戶滿意,可以付出大量的花里胡哨 - 從自動(dòng)消毒到密碼保護(hù),數(shù)據(jù)記錄和板載幫助屏幕 - 都需要付出代價(jià)。